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流式抗體搭配熒光素原則

更新時間:2010-12-21      瀏覽次數(shù):2088

流式抗體搭配熒光素原則


       流式抗體搭配流式熒光素主要有2個原則:*,每個通道只能選擇1種熒光素;第二,各個通道之間的熒光素可以隨意搭配,因此需要注意:
       1、流式抗體每個通道只能選擇1種熒光素。以Calibur為例說明,CaliburFL1通道選擇了Alexa Fluro488就不能選FITC ,或者選擇了FITC就不能選擇AlexaFluro488。CaliburFL3通道盡管能檢測PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7五個熒光素,但是我們搭配的時候只能選擇其中1個。
       2、各個通道之間的熒光素可以隨意搭配:如果客戶的流式細(xì)胞儀能做4個通道,在第1個原則之下,那么每個通道隨便選出1個熒光素就可以組合成4個顏色。以2跟激光的Calibur為例,Calibur各個熒光素之間可以搭配出16種組合。比如常用的搭配是F I T C( F L 1 )P EF L 2)+PerCPFL3+APC(FL4), 這個搭配組合可以更改成Alex Fluro(FL1)PEFL2)+PerCPFL3+APC(FL4), 或者FITC(FL1)PEFL2)+PerCPFL3+Alex Fluro(FL4),或者FITC(FL1)PEFL2)+PE-Cy5FL3+APC(FL4)等等??傊?,在第1原則之下,我們可以隨意搭配和組合各個熒光素。但是需要注意的是,APCPE-Cy5一起使用的話,上流式以后,容易導(dǎo)致補(bǔ)償過度。

所以說,以上也是流式抗體熒光素搭配的注意事項!

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